المبادئ التوجيهية المخبرية للكشف عن عدوى فيروس جدري القرود

أعلن المدير العام لمنظمة الصحة العالمية (WHO) أن تفشي جدري القرود العالمي المتصاعد يمثل حالة طوارئ صحية عامة تثير قلقًا دوليًا (PHEIC) في 23 يوليو 2022. ووفقًا لمنظمة الصحة العالمية، هناك أكثر من 35000 حالة في 92 دولة / إقليم، و12 الوفيات حتى 17 أغسطس. سافرت معظم الحالات المبلغ عنها (التي لها تاريخ سفر) إلى مناطق في أوروبا وأمريكا الشمالية.

جدري القرود هو مرض نادر ناجم عن العدوى بفيروس جدري القرود (MPXV) - وهو فيروس DNA مغلف مزدوج السلسلة ينتمي إلى نفس عائلة الفيروسات التي تسبب الجدري.يمكن أن ينتقل هذا الفيروس عن طريق ملامسة سوائل الجسم أو الآفات الموجودة على الجلد أو الأسطح المخاطية الداخلية مع أعراض مثل الحمى والصداع وآلام العضلات.تتراوح فترة حضانة جدري القرود عادة من 6 إلى 13 يومًا، ولكنها يمكن أن تتراوح من 5 إلى 21 يومًا (حوالي ثلاثة أسابيع).
وفقًا لمنظمة الصحة العالمية، فإن أفضل العينات التشخيصية يتم أخذها مباشرة من الطفح الجلدي، أو السوائل، أو القشور، أو الخزعة حيثما كان ذلك ممكنًا.قد لا تكون الطرق الأخرى مثل اكتشاف المستضد والأجسام المضادة مفيدة لأنها لا تميز بين فيروسات الجدري الأورثوبوكسي.

يوصى باتباع نهج قائم على المخاطر في معالجة العينات المأخوذة من حالات جدري القرود المشتبه فيها أو المحتملة أو المؤكدة في المختبر.ولذلك، فإن إجراءات الكشف عن وجود فيروس MPXV، المصنف على أنه أحد مسببات الأمراض من مجموعة الخطر 3، يجب تنفيذها في مختبر السلامة الحيوية من المستوى 2 باستخدام قائمة المعدات الموضحة أدناه.

دليل المعدات للكشف عن فيروس جدري القرود

تخزين العينات والكاشف

يوصى بتبريد عينات MPXV عند درجة حرارة 2 درجة مئوية إلى 8 درجات مئوية أو يجب تجميدها (-20 درجة مئوية أو أقل) خلال ساعة من جمعها.إذا تجاوز وقت النقل سبعة أيام، فيجب تخزين العينات في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو أقل.وفي الوقت نفسه، يُنصح بتخزين العينات على المدى الطويل عند -70 درجة مئوية (> 60 يومًا من التجميع).

تم تجهيز ثلاجات مختبر Biobase ومجمدات المختبرات ومجمدات درجات الحرارة المنخفضة للغاية بأنظمة تبريد جيدة التصميم ومواد عالية الجودة مناسبة لتخزين العينات البيولوجية الحساسة لدرجة الحرارة والتي تتطلب ظروف تخزين حرجة.

التعامل مع العينات وإعدادها

يمكن أن ينتقل فيروس MPXV أثناء مرحلة معالجة العينات بسبب المواد الملوثة أو الطرق غير السليمة.ونتيجة لذلك، ينبغي مراعاة زيادة تدابير السلامة البيولوجية.قبل تعطيل العينة، يجب تحضير العينات المأخوذة من المرضى الذين يشتبه في إصابتهم بفيروس MPXV في خزانة وظيفية للسلامة البيولوجية من الدرجة الثانية؛ومع ذلك، هذا غير مطلوب للعينات المعطلة بشكل صحيح.

بصرف النظر عن الحماية التي توفرها خزانات السلامة البيولوجية، فإن خزانات السلامة البيولوجية Biobase Class II متوافقة مع NSF 49 وEN 12469 مع ميزات سهلة الاستخدام ومغطاة بمسحوق مضاد للميكروبات على جميع الأسطح المطلية الخارجية والداخلية لتحسين السلامة.أجهزة الطرد المركزي ضرورية لفصل المكونات السائلة والصلبة للعينة.يُنصح باستخدام أكواب الأمان أو الدوارات المختومة إذا كانت ضرورية لهذا الإجراء.

الكشف والتحليل

يتم إجراء اختبار تضخيم الحمض النووي (NAAT) لتأكيد الإصابة بفيروس MPXV.للكشف عن تسلسل الحمض النووي الفيروسي الفريد، يتم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي (PCR) في الوقت الحقيقي.هناك خطوتين تشارك في الكشف عن الفيروسات.يكتشف تفاعل البوليميراز المتسلسل الأول فيروسات الأرثوبوكس لكنه لا يحدد النوع بينما يكتشف تفاعل البوليميراز المتسلسل الثاني (أو التسلسل) فيروس MPXV على وجه التحديد.

يوفر جهاز التدوير الحراري PCR في الوقت الحقيقي تضخيمًا فعالًا للأحماض النووية لتحليل الفيروسات.توفر Biobase أجهزة Swift™ PCR Thermal Cyclers الجديدة المزودة بجهاز كمبيوتر مدمج للتشغيل المستقل من خلال إدخال برنامج PCR ومراقبته وتحليله.